冰凍切片包埋劑的成分及如何去除?
更新時間:2023-03-09 點擊次數:540次
冰凍切片包埋劑是一種用于固定組織、使得組織變得硬化并使其易于切片的化學物質。主要由以下幾種成分組成:
1.聚合物
冰凍切片包埋劑的主要成分是聚合物,通常是一種可包埋的聚合物,如乙二醇二甲基亞硝酰胺(DDAO)、聚酰亞胺(PAI)等。這些聚合物可以形成一個堅硬的、可切割的支架結構,使得組織能夠在其中保持形狀。
2. 填充物
填充物是為了使得聚合物能夠覆蓋整個樣本所需的一組物質。最常見的填充物是甘油、乙二醇和丙二醇。這些物質能夠保護組織并且讓聚合物分散均勻。
3. 交聯劑
交聯劑是用于讓聚合物在固定組織時變得硬化并達到最終目的的一種化學物質,可以使得聚合物形成一個更加結實的、耐高溫、耐冷凍性能的網絡結構。常見的交聯劑是甲烷磺酸(MS)。
二、去除冰凍切片包埋劑的方法
冰凍切片包埋劑常常被用于樣本的冰凍切片和冰凍解剖。但是用后的冰凍切片包埋劑需要如何去除呢?以下介紹幾種常見的去除方法:
1. 利用溶劑
通常,幾種化學溶劑能夠很好地溶解冰凍切片包埋劑,如甲醇、乙醇、戊二醛等。與水混合使用時,它們通常需要按照一定的比例混合才能更好地去除包埋劑。因此,如果我們想快速地去除劑,可以考慮使用一些化學溶劑,這樣既能去除包埋劑,又能保留組織的形態。
2. 氧化還原
某些物質,如氫氧化鈉和氯酸,能夠促進氧化還原反應,進而促進聚合物與組織的脫離。在將冰凍樣本處理過程中,添加一定量的氫氧化鈉和氯酸,能夠幫助讓包埋劑更快地降解。當然,這種方法也有缺點,即影響組織形態。
3. 切割冰凍樣本
在冰凍樣本處理過程中,可能出現一些冰凍切片包埋劑殘留在樣本內的情況。如果存在此情況,可以考慮切割冰凍樣本。要想切割冰凍樣本,必須首先將樣本冰凍至一定溫度,然后將其定位到切片機上,在旋轉刀片的同時用力推壓樣本,直至切下樣本。
總之,冰凍切片包埋劑是一種在生物學研究中廣泛應用的化學物質,但是這種化學物質的氣味刺鼻且難以去除,因此在使用過程中,必須做好包埋劑的去除工作。上述幾種方法都能夠很好地去除包埋劑,但是在使用過程中要注意其對組織形態可能會產生的影響。